【知識(shí)積累】滲透壓儀常見問題匯總
點(diǎn)擊次數(shù):7580 更新時(shí)間:2021-11-16
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滲透壓儀
1.單位mOsmol/Kg、Osmol/Kg、mmol/L、mmHg、g/mol、道爾頓之間的關(guān)系?
答:滲透壓?jiǎn)挝籱Osmol/Kg、Osmol/Kg、mmHg
1Osmol/Kg=1000mOsmol/Kg
毫米汞柱(mmHg)是直接用水銀柱高度的毫米數(shù)表示壓強(qiáng)、壓力值的單位,毫米與毫巴間可以進(jìn)行換算。原理是以汞柱所產(chǎn)生的靜壓力來平衡大氣壓力P,因而汞柱的高度就可以度量大氣壓力的大小。在實(shí)驗(yàn)室,通常用毫米汞柱(mmHg)作為大氣壓力的單位。
標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(1.013X10^5Pa)內(nèi)可以這樣換算:P=1.013X10^5Pa=760mm·Hg或100帕=1毫巴≈3/4毫米水銀柱高,精確轉(zhuǎn)換是1mmHg=101325/760Pa。
滲透壓?jiǎn)挝唬河?升中所含的非電解質(zhì)或電解質(zhì)的毫摩爾表示,稱為毫滲透摩爾,簡(jiǎn)稱毫滲。
物質(zhì)的量的濃度:溶質(zhì)的物質(zhì)的量濃度是指單位體積溶液中所含溶質(zhì)的物質(zhì)的量,用符號(hào)C表示,常用單位為mol/L,1mol/L=1000mmol/L。
摩爾質(zhì)量:g/mol:?jiǎn)挝晃镔|(zhì)的量的物質(zhì)所具有的質(zhì)量(1mol物質(zhì)的質(zhì)量)即1mol該物質(zhì)所具有的質(zhì)量與摩爾質(zhì)量的數(shù)值等同.(物質(zhì)的摩爾質(zhì)量和該物質(zhì)的分子量數(shù)值等同)
物質(zhì)的量(n)、質(zhì)量(m)、摩爾質(zhì)量(M)之間的關(guān)系為:n=m/M
道爾頓:是分子量常用單位,就是將分子中所有原子按個(gè)數(shù)求原子量的代數(shù)和。
分子的摩爾質(zhì)量(M)與分子的相對(duì)質(zhì)量(Mr)的關(guān)系為:
M=10-3Mrkg×mol-1
2.冰點(diǎn)滲透壓、膠體滲透壓、膜滲透壓、漏點(diǎn)滲透壓之間的區(qū)別?
冰點(diǎn)滲透壓:根據(jù)拉烏爾冰點(diǎn)原理,以溶液冰點(diǎn)下降值與溶液的摩爾濃度成比例關(guān)系為基礎(chǔ),采用高靈敏的感溫元件—熱敏電阻測(cè)量不同溶液的結(jié)冰點(diǎn)。
露點(diǎn)滲透壓:應(yīng)用沸點(diǎn)升高原理,水蒸氣壓技術(shù),將溶液加熱使之蒸發(fā),來測(cè)量樣品滲透壓,是利用熱電偶凝結(jié)溶液樣品被蒸發(fā)而產(chǎn)生的蒸氣感應(yīng)測(cè)量。
露點(diǎn)法跟冰點(diǎn)法相比較所具有的
優(yōu)勢(shì):
*不需要改變物質(zhì)的物象形態(tài)
*可以處理冰點(diǎn)法無法處理的多用于臨床和工業(yè)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的半固態(tài)樣品。
*對(duì)于樣品中含有懸浮顆?;蛘吵矶容^大的樣品,可以輕松得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
*可以直接測(cè)量植物以及動(dòng)物組織切片的滲透壓。如植物的葉片,動(dòng)物的腦和腎臟切片。
劣勢(shì):
露點(diǎn)滲透壓儀不能用來檢測(cè)乙醇等揮發(fā)性溶液的樣品,尤其是受熱易分解的樣品,而冰點(diǎn)滲透壓儀可以。
膠體滲透壓:是由測(cè)量池來測(cè)量的,測(cè)量池被半透膜分開,下半部與外界隔離,充滿含電解質(zhì)的林格液,上半部與外界相連,里面充滿含膠體的溶液。膜僅允許水和電解質(zhì)通過,兩個(gè)溶液的滲透壓不同,溶液能從測(cè)量池的下半部滲透到上半部,直到下半池內(nèi)的壓力與膠體摩爾濃度達(dá)到平衡。直接測(cè)量由液體靜壓的變化引起的壓力。
膜滲透壓:滲透池被一個(gè)半透膜分成兩部分。在*密封的下半部,充滿純?nèi)軇?,安裝了精確的壓力計(jì)系統(tǒng)。在半滲透膜的上半測(cè)量池,設(shè)計(jì)成曲線型通道系統(tǒng),具有大的表面。漏斗和排液系統(tǒng)能用溶劑沖洗和注入測(cè)量池。由于溶劑和溶液滲透壓不同,在下半池形成一個(gè)真空度代表滲透活性溶解顆粒的濃度。
3.010、030、050、070、090、auto型號(hào)之間的區(qū)別,如何選型?(流程圖)
A、測(cè)量原理不同
010,030,auto是冰點(diǎn)滲透壓;050膠體滲透壓;070露點(diǎn)滲透壓;090膜滲透壓
B、應(yīng)用不同
030適用于檢測(cè)水溶液滲透壓;010是基于030設(shè)計(jì)的,適用于測(cè)定苯溶液摩爾分子量和水溶液總滲透壓;auto也是基于030設(shè)計(jì)的,全自動(dòng)測(cè)量系統(tǒng)可以滿足高通量的樣本測(cè)量,每次最多可同時(shí)測(cè)量20個(gè)樣品;050是為醫(yī)藥領(lǐng)域測(cè)試膠體的滲透壓,主要是測(cè)血漿或血清以及大分子物質(zhì)的滲透壓;070適合測(cè)定水溶液的滲透壓和溶解在不同有機(jī)溶劑中聚合物平均分子量;090測(cè)定溶解在水或有機(jī)溶劑中聚合物的平均分子量。
C、測(cè)量范圍不同
010:滲透壓:0-3000mOsmol/kg,分子量:40-5000道爾頓
030:滲透壓:0-2500mOsmol/kg
Auto:滲透壓:0-2500mOsmol/kg
050:99.9mmHg,99.9帕斯卡
070:滲透壓:水溶液:0.1-1.5Osmol/kg;有機(jī)溶液:0.001-0.03Osmol/kg
分子量:水溶液:50-5,000道爾頓;有機(jī)溶液:40-5,000道爾頓
090:分子量:5,000-2,000,000道爾頓
選型流程:
4.二點(diǎn)校準(zhǔn)與三點(diǎn)校準(zhǔn)的區(qū)別,如何選擇第三個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)?
答:三點(diǎn)校準(zhǔn)比二點(diǎn)校準(zhǔn)具有更廣的相對(duì)直線度公差+/-1%的范圍,更加準(zhǔn)確。
第三個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)即CAL2校準(zhǔn)點(diǎn)的確定:與c1相差最小的校準(zhǔn)點(diǎn)之后的所有校準(zhǔn)點(diǎn)。
可能的校準(zhǔn)點(diǎn)如下:
1.Zero:用蒸餾水校準(zhǔn)
2.CAL1:100,200,300,500,700,850,900,1200,1500,1800,2000,2500
3.CAL2:300,500,700,850,900,1200,1500,1800,2000,2500,3000
例如:
CAL1=100mOsmol/kg:CAL2可以是自300mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點(diǎn)。
CAL1=200mOsmol/kg:CAL2可以是自500mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點(diǎn)。
CAL1=300mOsmol/kg:CAL2可以是自700mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點(diǎn)。
CAL1=2000mOsmol/kg:CAL2可以是3000mOsmol/kg校準(zhǔn)點(diǎn)。
5.正確的校準(zhǔn)步驟是什么?
以三點(diǎn)校準(zhǔn)為例,步驟如下:
1)0點(diǎn)
a)按'Zero'鍵。
b)用測(cè)試管盛裝50μL的蒸餾水。
c)設(shè)備自動(dòng)運(yùn)行校準(zhǔn)測(cè)量值。
d)確認(rèn):用蒸餾水再次進(jìn)行測(cè)量。
2)第一次校準(zhǔn)點(diǎn)300mOsmol/kg
a)按'CAL1'鍵。
b)用測(cè)試管盛裝50μLGonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液。
c)設(shè)備自動(dòng)運(yùn)行校準(zhǔn)測(cè)量值。
d)確認(rèn):用Gonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液再次進(jìn)行測(cè)量。
3)第二次校準(zhǔn)點(diǎn)850mOsmol/kg
a)按'CAL2'鍵。
b)用測(cè)試管盛裝50μLGonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液。
c)設(shè)備自動(dòng)運(yùn)行校準(zhǔn)測(cè)量值。
d)確認(rèn):用Gonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液再次進(jìn)行測(cè)量。
6.多長(zhǎng)時(shí)間做一次校準(zhǔn)?
當(dāng)測(cè)量出現(xiàn)較大誤差時(shí)需要校準(zhǔn)儀器,建議可在樣品中增加蒸餾水樣品,當(dāng)儀器的偏差較大時(shí)應(yīng)校準(zhǔn)。010在進(jìn)行摩爾質(zhì)量測(cè)定前,必須用已知質(zhì)量摩爾濃度或滲透壓的溶液校準(zhǔn)儀器。
7.取樣時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些?
取樣體積要符合儀器測(cè)量要求,保證樣品中沒有氣泡。
8.樣品量的多少對(duì)測(cè)量時(shí)間和精度有什么影響?
答:一般測(cè)量的樣品量在50ul左右(M型除外),樣品量過多會(huì)延長(zhǎng)測(cè)量的時(shí)間或者出現(xiàn)無法結(jié)晶的情況,同時(shí)測(cè)量的準(zhǔn)確性也會(huì)有所下降。樣品量過少可能影響冰晶的注入導(dǎo)致無法結(jié)晶,同時(shí)對(duì)測(cè)量的重復(fù)性有所影響(使重復(fù)性降低)。
9.零點(diǎn)校準(zhǔn)時(shí),應(yīng)該選擇什么樣的水?
答:選擇蒸餾水或去離子水。
10.SPONT.CRYST燈亮?xí)r,如何排除故障?(過早結(jié)晶)
答:稀釋樣品。
1)晶種也有可能附著在熱敏電阻探頭上,用水*清洗熱敏電阻探頭,然后用軟棉紙擦干。如果熱敏電阻探頭上表面有劃痕,更換熱敏電阻探頭。
2)不干凈測(cè)試管(例如內(nèi)壁有灰塵)也可能導(dǎo)致自動(dòng)結(jié)晶。重復(fù)使用測(cè)試管可能導(dǎo)致測(cè)試管塑料破裂,產(chǎn)生液膜(作用類似于晶種),最終會(huì)造成過早結(jié)晶。因此建議測(cè)試管只使用一次。
a)簡(jiǎn)單地加熱樣本液,達(dá)到沸點(diǎn)后再冷卻。
b)前種方法不能去除的晶種,過濾去除。
c)稀釋樣本。當(dāng)冷卻的樣品溶液中含低溶性鹽或者含鹽濃度接近飽和,這時(shí)就會(huì)有鹽晶
形成。稀釋可以幫助去除鹽晶,但可能因此無法得到精確的結(jié)果。
d)用水*清洗熱敏電阻探頭,然后用軟棉紙擦干。
e)如果玻璃球有劃痕,更換熱敏電阻探頭。
f)確保測(cè)試管內(nèi)部沒有灰塵。
g)確保測(cè)試管內(nèi)部沒有液膜,否則可能導(dǎo)致過早結(jié)晶.測(cè)試管僅能使用一次。重復(fù)使用測(cè)試管可能導(dǎo)致不重復(fù)性結(jié)果。重復(fù)使用可能導(dǎo)致測(cè)試管塑料破裂,產(chǎn)生新液膜,會(huì)造成過早結(jié)晶。
11.NO.CRYST燈亮?xí)r,如何排除故障?(無結(jié)晶)
答:沒有結(jié)晶的原因有兩點(diǎn):
?、鸥邼B透壓:充分稀釋樣品溶液。但是必須小心解讀稀釋后的結(jié)果,因?yàn)闈B透壓不一定與稀釋度成比例。
?、谱⑷氡o效:如果在結(jié)晶過程中聲信號(hào)已經(jīng)響起,盡管樣品液滲透壓在正常范圍內(nèi),卻沒有結(jié)晶產(chǎn)生,有三種可能原因:
a、傳送冰晶的針移動(dòng)受阻,機(jī)械故障妨礙了針移動(dòng)。解決方法:卸下電阻探頭。然后將針弄直、復(fù)位,檢查確保機(jī)械性能正常。按住設(shè)備后面的MOTOR紐,檢驗(yàn)針的移動(dòng)情況。
b、盡管機(jī)械性能正常不會(huì)妨礙針移動(dòng),但不銹鋼針尖上的冰晶無法到達(dá)過冷卻樣品溶液中。覆蓋冰的針尖需通過一個(gè)小孔才能到達(dá)樣品??咨峡赡苡兴巍K慰赡軐?dǎo)致冰晶粘到孔的內(nèi)壁上而融化。解決方法:將帶有配件的巴斯德吸管與一根長(zhǎng)管連接,用其吹掉孔上的水滴。建議移開測(cè)試管,然后用熱敏電阻探頭下面的紙巾擦掉水滴。隨著時(shí)間的推移,孔上積留了少量的樣品殘液。用裝水的噴霧瓶沖洗孔上殘液。清潔過程中,不需關(guān)閉設(shè)備。
c、上冷卻系統(tǒng)沒有冰形成,因?yàn)闈穸忍突蛘呦到y(tǒng)開啟后過早進(jìn)入工作狀態(tài)。解決方法:系統(tǒng)開啟至少2分鐘后,再開始測(cè)量。如果空氣濕度非常低(例如冬天在加熱的房間),打開上冷卻系統(tǒng)的蓋子。必須考慮到一些重要的條件,以確保測(cè)量結(jié)果的重復(fù)性。
12.如何確保結(jié)晶針正常工作?
答:首先檢測(cè)結(jié)晶針是否在上冷卻系統(tǒng)的凹槽內(nèi),如果發(fā)生錯(cuò)位請(qǐng)用鑷子等將結(jié)晶針復(fù)位。另外可以按儀器背面“motor”鍵從側(cè)面觀察結(jié)晶針的運(yùn)行情況。
13.如何安裝打印紙和色帶?打印紙如何選擇?
針對(duì)010,030:
更換打印紙:
A)將兩個(gè)螺釘擰下,移去樹脂玻璃外罩。
B)輕按打印機(jī)的下部,打開放紙區(qū)。
C)取出空的紙卷筒,按"PAPERFEED"鍵,將剩余的打印紙通過出紙口輸出。不可用向后拉紙帶的方式取出剩余的打印紙。
D)插入一卷新打印紙。打開OSMOMAT010和打印機(jī)。將打印紙前端剪齊從上端插入出紙口。按"PAPERFEED"鍵,使紙帶突出出紙口約2厘米。要確保卷紙的滾動(dòng)方向正確。新的紙卷放入紙盒后關(guān)閉打印機(jī)。
E)紙帶穿過樹脂玻璃外罩孔縫,然后固定外罩。下一次測(cè)量開始前,按COUNTERRESET鍵,打印頁眉。
打印紙選擇:標(biāo)準(zhǔn)寬度:43mm,卷軸直徑:34mmGonotec貨號(hào)30.9.1010。保證大小合適即可。
更換色帶:
當(dāng)打印的結(jié)果不再清晰,必須更換色帶墨盒。更換色帶時(shí),OSMOMAT010可打開也可關(guān)閉。
A)更換色帶前,撕下出紙口處突出的紙帶。
B)將兩個(gè)螺釘擰下(5圖6),移去樹脂玻璃外罩(6圖6)。
C)輕按色帶盒的右側(cè),取下色帶盒。
D)替換新的色帶盒Gonotec貨號(hào)30.9.1020。
E)順時(shí)針擰旋鈕,繃緊色帶.
F)將新的色帶盒放入打印機(jī)。紙帶的前端置于色帶和盒之間。
G)再擰旋鈕,繃緊色帶。
H)固定樹脂玻璃外罩。
14.如何安裝軟件和連接電腦?
答:
1)選擇有RS232數(shù)據(jù)接口的電腦,將Gonotec的軟件放入電腦驅(qū)動(dòng)內(nèi)按照磁盤安裝提示完成軟件的安裝。
2)用數(shù)據(jù)線連接儀器和電腦。
3)先啟動(dòng)電腦中終端軟件,再打開儀器電源開關(guān)。
4)儀器左邊三個(gè)LED燈閃爍,儀器進(jìn)入自檢狀態(tài)。
5)儀器自檢完畢,“sample”燈亮起,可以進(jìn)入想要的操作。
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